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細(xì)胞培養(yǎng)基該如何選擇

更新日期: 2023-06-27
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細(xì)胞培養(yǎng)液指細(xì)胞生長(zhǎng)的液體環(huán)境,一般指完全培養(yǎng)液,添加了血清、水解乳蛋白、各種添加劑等可以直接使用的培養(yǎng)液。
解凍:
將血清從冰凍區(qū)中取出后(切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀),先置于2~8℃區(qū)域中使之融化,然后在室溫下使之全融。使用前再預(yù)溫到將使用的溫度(如37℃),但必須注意的是,解凍過(guò)程中應(yīng)輕輕地?fù)u晃均勻。血清在解凍過(guò)程中可能會(huì)出現(xiàn)少量絮狀或片狀析出物,主要是血清中脂蛋白的變性或是纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)析出,但這些析出物,并不影響血清本身的質(zhì)量。若一次無(wú)法用完一瓶,建議無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。
選擇哪種培養(yǎng)基并沒(méi)有一定的標(biāo)準(zhǔn),有幾點(diǎn)建議可供參考:
1.其它實(shí)驗(yàn)室慣用的培養(yǎng)基不妨一試,許多培養(yǎng)基可以適合多種細(xì)胞。
2.根據(jù)細(xì)胞株的特點(diǎn)、實(shí)驗(yàn)的需要來(lái)選擇培養(yǎng)基。
3.用多種培養(yǎng)基培養(yǎng)目的細(xì)胞,觀察其生長(zhǎng)狀態(tài),可以用生長(zhǎng)曲線、集落形成率等指標(biāo)判斷。
注意事項(xiàng):
1.建議盡量選擇與所用量相匹配的包裝一次使用,因?yàn)榘b一旦打開(kāi),組分可能會(huì)變質(zhì)或因受潮而結(jié)團(tuán)。
2.如需添加的組分較多時(shí),某一組分完全溶解后,再添加另一組分。
3.所有成分完全溶解后,培養(yǎng)基應(yīng)立即過(guò)濾或高壓除菌,以免產(chǎn)生沉淀或有微生物污染。
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